實(shí)驗(yàn)接種操作中常見問(wèn)題匯總及分析

發(fā)布時(shí)間：

2023-11-18 14:51

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記住下面這十條小訣竅讓您在實(shí)驗(yàn)接種操作中輕松實(shí)驗(yàn)！

一、劃不出單個(gè)菌落怎么辦？

（1）平板上有過(guò)多的水分。

（2）劃線時(shí)接種環(huán)未經(jīng)反復(fù)灼燒。

（3）多區(qū)劃線，三區(qū)或四區(qū)劃線。

二、培養(yǎng)基配制時(shí)應(yīng)注意的問(wèn)題

（1）滅菌溫度要嚴(yán)格控制，按照要求滅菌，尤其含糖量較高的培養(yǎng)基溫度不應(yīng)太高，過(guò)高會(huì)導(dǎo)致糖分焦化，影響質(zhì)量。

（2）瓊脂培養(yǎng)基不能反復(fù)溶化。反復(fù)溶化會(huì)破壞培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分。

（3）培養(yǎng)基不能反復(fù)滅菌，反復(fù)滅菌也會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)成分的破壞。

（4）含瓊脂的培養(yǎng)基滅菌后，要搖勻。

三、平板的保存

大多數(shù)平板如VRBA、DC、尿素酶生化管、顯色系列等要避光低溫保存。

四、產(chǎn)品的保存

（1）干粉培養(yǎng)基：避光干燥，結(jié)塊后不能使用。

（2）亞碲酸鉀卵黃增菌液、50%卵黃乳液等：冷凍保存，使用時(shí)，要常溫解凍，避免水浴加熱。

（3）抗生素類：冷藏保存，溫度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致靈敏度的下降。

（4）兔血漿：冷藏保存少量的紅色不會(huì)影響結(jié)果。

五、觀察時(shí)間的掌握

按GB等標(biāo)準(zhǔn)或培養(yǎng)基的使用說(shuō)明所述時(shí)間進(jìn)行觀察，時(shí)間過(guò)短或時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，單菌落的特征都不會(huì)很明顯。如單增李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基，時(shí)間短單菌落看不到卵磷脂環(huán)，時(shí)間長(zhǎng)綿羊李氏菌也會(huì)產(chǎn)生沉淀環(huán)。PALCAM的觀察也如此，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，李氏菌使整個(gè)平板成黑色，不利于觀察單個(gè)菌落。

六、添加劑的添加

（1）溫度的掌握。卵黃和抗生素類添加的溫度都不應(yīng)太高。

（2）定量。過(guò)多會(huì)抑制一些目標(biāo)菌，太少又導(dǎo)致雜菌的過(guò)度生長(zhǎng)。

七、培養(yǎng)溫度的掌握

（1）真菌類。25-28℃培養(yǎng)。

（2）細(xì)菌類。李氏菌在增菌和生化中要求培養(yǎng)溫度在30℃左右。

（3）其他一般在36℃左右。

八、接種方法

常用的方法主要有劃線、三點(diǎn)接種、穿刺接種、傾注接種、涂布接種、液體接種。

九、革蘭氏染色方法

染色時(shí)間的掌握、沖洗的方法。

十、生化實(shí)驗(yàn)